一、什么是探針
探針是電測試的接觸媒介,為高端精密型電子五金元器件。
二、探針是干什么用的
探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段(大約是20到500bp),用于檢測與其互補(bǔ)的核酸序列。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈,隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、熒光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標(biāo)記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團(tuán)中,而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。
當(dāng)將探針與樣品雜交時,探針和與其互補(bǔ)的核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相連,隨后,未被雜交的多余探針被洗去。最后,根據(jù)探針的標(biāo)記物種類,可進(jìn)行放射自顯影、熒光發(fā)光、酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光等方法來判斷樣品中是否,或者何位置含有被測序列(即與探針互補(bǔ)的序列)。
三、探針和引物的區(qū)別
1、兩者的用途不同:
(1)引物設(shè)計的用途:用于PCR擴(kuò)增技術(shù)。
(2)探針設(shè)計的用途:用于標(biāo)記待定的核苷酸片斷,用與特異性地、定量地檢測核酸的量。
2、兩者的實質(zhì)不同:
(1)引物設(shè)計的實質(zhì):一小段單鏈DNA或RNA,在核酸合成反應(yīng)時,作為每個多核苷酸鏈進(jìn)行延伸的出發(fā)點而起作用的多核苷酸鏈。
(2)探針設(shè)計的實質(zhì):在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光,并且其熒光性質(zhì)(激發(fā)和發(fā)射波長、強(qiáng)度、壽命、偏振等)可隨所處環(huán)境的性質(zhì),如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。