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核酸檢測(cè)操作流程有哪些 核酸檢測(cè)的原理是什么

摘要:很多人以為核酸檢測(cè)就是采集一下就完成了,其實(shí)核酸檢測(cè)遠(yuǎn)比這復(fù)雜的多,核酸檢測(cè)操作流程有采集分泌物、進(jìn)行留樣、樣本送檢、核酸提取、熒光PCR核酸檢測(cè)、核酸檢測(cè)報(bào)告,很多操作步驟都要手工進(jìn)行,因此需要花費(fèi)一定的時(shí)間。核酸檢測(cè)的原理是利用熒光定量PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。接下來本文將簡(jiǎn)單介紹核酸檢測(cè)操作流程有哪些以及核酸檢測(cè)的原理是什么,一起來看看吧!

一、核酸檢測(cè)操作流程有哪些

目前,全國(guó)大部分城市都提供了核酸檢測(cè),那么,核酸檢測(cè)要經(jīng)過哪些步驟呢?下面一起了解下核酸檢測(cè)操作流程有哪些:

1、采集分泌物

首先,醫(yī)務(wù)人員會(huì)使用咽拭子擦拭受檢者鼻腔或者喉嚨扁桃體處,采集唾液分泌物,這個(gè)過程其實(shí)蠻疼的。

2、進(jìn)行留樣

將人體分泌物采集出來以后,咽拭子浸到保存液中,將管子蓋子旋好進(jìn)行留樣。

3、樣本送檢

然后,將樣本裝入到干凈的密封袋中封好,送到相關(guān)部分進(jìn)行檢測(cè)。

4、核酸提取

相關(guān)部門將送來的樣本,送到指定實(shí)驗(yàn)室做核酸提取實(shí)驗(yàn)。

5、熒光PCR核酸檢測(cè)

核酸提取出來以后,再使用熒光PCR進(jìn)行檢測(cè)使用,檢測(cè)是否有擴(kuò)增反應(yīng),也就是判斷陰性還是陽(yáng)性。

6、出核酸檢測(cè)報(bào)告

最后,根據(jù)核酸檢測(cè)的熒光PCR反應(yīng)結(jié)果,得出核酸檢測(cè)報(bào)告,本人查詢結(jié)果即可。

二、核酸檢測(cè)的原理是什么

檢測(cè)新型冠狀病毒特異序列的方法最常見的是熒光定量PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。因PCR反應(yīng)模板僅為DNA,因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前,應(yīng)將新型冠狀病毒核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為DNA。在PCR反應(yīng)體系中,包含一對(duì)特異性引物以及一個(gè)Taqman探針,該探針為一段特異性寡核苷酸序列,兩端分別標(biāo)記了報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;如反應(yīng)體系存在靶序列,PCR反應(yīng)時(shí)探針與模板結(jié)合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解,報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出熒光。

每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)(Ct值)與病毒核酸濃度有關(guān),病毒核酸濃度越高,Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會(huì)依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽(yáng)性判斷值。

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