一、分光光度計的組成部分
分光光度計的型號繁多,但其基本結構由以下幾部分組成:光源、單色器、吸收池、檢測系統(tǒng)及信號顯示系統(tǒng)。
1、光源
在吸光度的測量中,要求光源發(fā)出的所需波長范圍內的連續(xù)光譜具有足夠的光強度,并能在一定時間內保持穩(wěn)定。
2、單色器
單色器是能將光源發(fā)射的連續(xù)光源分解為單色光并從中選出任一波長單色光的光學系統(tǒng)。它由入射狹縫、準光器、色散原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個部分組成。
3、吸收池
吸收池又稱比色皿,用于盛裝參比溶液和待測試液。儀器一般配有液層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比色皿。
4、檢測系統(tǒng)
檢測系統(tǒng)通常通過利用光電效應將透過吸收池的光信號轉變?yōu)榭蓽y的電信號,而且所產生的電信號應與照射于檢測器上的光信號成正比。可見分光光度計常常使用光電管或光電倍增管做檢測器。
5、信號顯示系統(tǒng)
光電轉換器產生的各種電信號,經放大等處理后,用一定方式顯示出來,以便于計算和記錄。
二、分光光度計原理
分光光度計的原理是采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度,樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
三、分光光度計的種類
1、可見分光光度計
用來測量待測物質對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計。
2、紫外可見分光光度計
紫外可見光譜儀用來測量待測物質對可見光或紫外光(200-760nm)的吸光度并進行定量分析的儀器,可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。
3、紅外分光光度計
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機化合物最常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。
4、熒光分光光度計
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,應用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域,通過對這些參數的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化,從而闡明分子結構與功能之間的關系。