一、熒光酶標儀和普通酶標儀的區(qū)別在哪里
熒光酶標儀和普通酶標儀兩者最大的區(qū)別就是原理的不同。
1、 熒光酶標儀
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質的激發(fā)光,被測的熒光物質在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光,經過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經過放大器放大輸至記錄儀,激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當測繪熒光發(fā)射光譜時,將激發(fā)光單色器的光柵,固定在最適當的激發(fā)光波長處,而讓熒光單色器凸輪轉動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上,所記錄的光譜即發(fā)射光譜。
當測繪熒光激發(fā)光譜時,將熒光單色器的光柵固定在最適當的熒光波長處,只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉動,將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀,所記錄的光譜即激發(fā)。
當進行樣品溶液的定量分析時,將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處,將熒光單色器調節(jié)至所選擇的熒光波長處,由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。
2、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值。
光通過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關系。
檢測單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
二、熒光酶標儀和 普通酶標儀哪個更好
前文已經簡單了解到了熒光酶標儀和普通酶標儀的區(qū)別在哪里,那么在選擇的時候,熒光酶標儀和普通酶標儀哪個更好呢?
1、普通酶標儀(以光吸收酶標儀為例)
優(yōu)點:檢測檢測技術成熟,成本低,操作簡單。
缺點:動態(tài)范圍窄,靈敏度比較低,特異性不強。
2、熒光酶標儀
優(yōu)點:靈敏度高,可實時檢測,使用方便,檢測模式多樣。
缺點:易受外界干擾,激發(fā)光與發(fā)射光容易互相影響。
因此,兩者比較起來,各有自己的優(yōu)缺點,根據自己的實際情況進行選擇即可。