一、液相色譜儀操作流程是什么 ?
生活中液相色譜儀并不常見,液相色譜儀是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。那么液相色譜儀操作流程是什么呢?一起來看看吧!
首先先對流動相進(jìn)行過濾,根據(jù)需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。然后對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩(wěn)定,最重要的是儀器基線走后,方可進(jìn)樣測試。
二、液相色譜儀操作注意事項有哪些
1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)。
2、流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。
4、使用緩沖溶液時,做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗。
5、長時間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機相,因為純水易長霉。
6、每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。
7、C18柱絕對不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8、堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗。
9、氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10、如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進(jìn)行流動相的清洗。
11、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12、更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。