一、分光光度計是測什么的

分光光度計，又稱光譜儀（spectrometer），是將成分復雜的光，分解為光譜線的科學儀器。分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：200～380nm的紫外光區(qū)，380～780nm的可見光區(qū)，2.5～25μm（按波數(shù)計為4000cm～400cm）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準確度，所有儀器應按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進行校正檢定。

分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。

二、光譜儀和分光光度計區(qū)別

“光譜儀”和“分光光度計”是同一類儀器，但是“光譜儀”的名稱之前是不需要冠之以“分光”的，因為要想得到光譜，就必須分光。光度計可以是積分光度計（光強計），不需要分光；一旦分光，它就是“光譜儀”。另外，“光譜儀”和“分光光度計”的結構區(qū)別是：“光譜儀”分光不需要掃描（如CCD光譜儀），工作速度快；“分光光度計”分光需要掃描，工作速度慢。

三、分光光度計的組成部分

1、光源

在吸光度的測量中，要求光源發(fā)出的所需波長范圍內(nèi)的連續(xù)光譜具有足夠的光強度，并能在一定時間內(nèi)保持穩(wěn)定。

2、單色器

單色器是能將光源發(fā)射的連續(xù)光源分解為單色光并從中選出任一波長單色光的光學系統(tǒng)。它由入射狹縫、準光器、色散原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個部分組成。

3、吸收池

吸收池又稱比色皿，用于盛裝參比溶液和待測試液。儀器一般配有液層厚度為0.5cm、1cm、2cm、3cm等的長方形比色皿。

4、檢測系統(tǒng)

檢測系統(tǒng)通常通過利用光電效應將透過吸收池的光信號轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y的電信號，而且所產(chǎn)生的電信號應與照射于檢測器上的光信號成正比?？梢姺止夤舛扔嫵３Ｊ褂霉怆姽芑蚬怆姳对龉茏鰴z測器。

5、信號顯示系統(tǒng)

光電轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生的各種電信號，經(jīng)放大等處理后，用一定方式顯示出來，以便于計算和記錄。

四、分光光度計原理

分光光度計的原理是采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度，樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

五、分光光度計的種類

1、可見分光光度計

用來測量待測物質(zhì)對可見光的吸光度并進行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計。

2、紫外可見分光光度計

紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光（200-760nm）的吸光度并進行定量分析的儀器，可以測定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細菌細胞密度。

3、紅外分光光度計

一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機化合物最常用的光譜區(qū)域，能分析各種狀態(tài)（氣、液、固）的試樣。

4、熒光分光光度計

熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器，應用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域，通過對這些參數(shù)的測定，不但可以做一般的定量分析，而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化，從而闡明分子結構與功能之間的關系。

六、分光光度計使用步驟方法

1、接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2、將靈敏度開關調(diào)至“1”檔（若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時，需選用較高檔。）

3、根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。

4、將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使空白管對準光路。

5、在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向t=0處。

6、蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7、比色完畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

七、分光光度計使用注意事項

1、該儀器應放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，室內(nèi)照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

2、使用本儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應該對儀器的安全性能進行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。

3、在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進行調(diào)節(jié)。